برادران ایتالیایی - آمریکایی ماریو و لوئیجی، اخیراً یک تجارت لوله‌کشی در منطقه بروکلین شهر نیویورک راه‌اندازی کرده‌اند که مورد تمسخر کارفرمای سابق خود اسپایک و شماتت پدرشان قرار گرفته است. این دو برادر پس از مشاهده خبر نشتی آب در یکی از مناطق شهر، به زیر زمین می‌روند تا لوله‌ها را تعمیر کنند، اما به درون یک مارپیچ لوله‌ای می‌افتند. ماریو در پادشاهی قارچ که توسط پرنسس پیچ اداره می‌شود، فرود می‌آید، در حالی که لوئیجی سر از سرزمین‌های تاریک که پادشاه باوزر در آن حکومت می‌کند، در می‌آورد. با کمک پرنسس پیچ، ماریو آماده می‌شود تا در برابر باوزر قدرتمند مبارزه کرده و از تسخیر جهان جلوگیری کند.